【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：DNA/RNA病毒核酸提取試劑盒（吸附柱法）

英文名稱：Saliva DNA/RNA Extraction Kit （Adsorption column method）

【包裝規(guī)格】50份/盒

【預期用途】

本試劑盒適用于從各種樣本中高效提取基因組DNA/RNA，專門用于唾液、血清、環(huán)境等樣本的核酸提取、富集、純化等步驟。本試劑盒提取的DNA/RNA可以用于Real-time PCR、測序等分子生物學實驗。

【檢驗原理】

試劑盒采用獨特作用的裂解液和緩沖液系統(tǒng)，配合高效吸附DNA/RNA的吸附膜，在一定條件下對DNA/RNA具有極強的吸附富集能力，當條件改變時又可以可逆地釋放DNA/RNA，從而達到快速分離純化DNA/RNA、并最大限度地去除蛋白質(zhì)、鹽等雜質(zhì)的目的，從而保證提取核酸的純度。

【試劑組成】

 【儲存條件及有效期】

所有組分均可室溫保存，保存得當可穩(wěn)定使用12個月。

【自備材料】

渦旋振蕩儀、離心機、1.5ml、2ml無菌離心管等試劑盒內(nèi)沒有提供的設備和耗材。

 【樣本處理】

1. 如采集到的樣品是血清樣本，則需先將樣本分離到1.5或2ML離心管中，高速10000rpm離心1分鐘，取上清液體進行下一步核酸提??；如是環(huán)境樣本則順離3秒到5秒，取上清。

2. 如采集到的是新鮮豬口腔唾液樣本，則需加入到含有等量唾液保護液的采集瓶中待檢，若唾液樣本含有明顯雜質(zhì)，可先吸取1ml含唾液保護液的唾液樣本至1.5ml離心管，然后離心機10000rpm離心30S左右，取上層液體進行下一步核酸提取。

3. 如檢測的是飼料樣本，則取0.2mg左右的樣本至2ml的離心管中，再加入1.8ml的純凈水，然后旋渦混勻，高速10000rpm離心1分鐘，取上清備用。

【核酸提取】

1. 離心管內(nèi)加入待檢液體樣本 300ul，加入 400ul 裂解液，輕搖，混勻30秒，然后再靜置5分鐘，靜置期間再輕搖，混勻一次；加200ul無水乙醇，輕搖、混勻20秒。

2. 取上述離心管內(nèi)液體450ul至吸附柱中，加入清洗液 I 300ul，混勻，高速10000rpm離心30 秒，棄液；再取上述離心管液體450ul至吸附柱中，加入清洗液 I 300ul，混勻，高速10000rpm離心30 秒，棄液；

3. 吸附柱內(nèi)加入 600ul 清洗液II，高速10000rpm離心30 秒，棄液；（重復此步驟 1 次）

4.除醇：棄液后，高速10000rpm離心，空轉(zhuǎn)2分鐘，棄收集管；

5.核酸洗脫

將吸附柱放入新的1.5mL離心管中，向吸附柱的濾膜中加入50 μL洗脫液，室溫靜置1min，10000rpm離心1min，棄吸附柱，收集DNA/RNA。

【注意事項】

1. 本試劑盒中的所有組分均可存放于室溫；

2. 檢測唾液時最好采用新鮮樣本，樣本延時檢測或反復凍融會導致核酸提取量明顯降低；

3. 檢測環(huán)境樣本時，因環(huán)境樣本雜質(zhì)較多，為了增加提取效率，在提取前最好先加入預處理液對樣本進行預處理。

4. 請仔細閱讀本說明書，并嚴格按照操作步驟完成操作。

【參考文獻】

1.Yung, H. (2010) Rapid and direct DNA extraction from saliva for personalized medicine.

2.Jaroslava Durdiaková（2012）Comparison of different collection procedures and two methods for DNA isolation from saliva.

※僅供科研使用